MMLV Reverse Transcriptase

2024-07-10 11:23






   提高MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶的熱穩(wěn)定性





MMLV繪圖 熱穩(wěn)定性.png

圖1


MMLV繪圖 建庫產(chǎn)量.png

圖2




結(jié)果分析:

  • 基于MTPS篩選,獲得熱穩(wěn)定性高遠優(yōu)于親本的MMLV突變體;

  • 相較于野生型WT,突變體的Tm值提高了5℃。且cDNA產(chǎn)量圖表明,M-MLV突變體188,305同樣表現(xiàn)出優(yōu)秀的合成cDNA的能力(圖1);

  • M-MLV突變體在6個月和12個月的預(yù)混液中均展現(xiàn)出比WT對照更高的建庫產(chǎn)量。特別是,12個月預(yù)混的產(chǎn)量比6個月的還要高,說明長期預(yù)混并未降低其建庫效率,反而可能有所提升(圖2)。








   提高MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶的酶活性





圖3




結(jié)果分析:

  • 基于MTPS篩選,獲得cDNA產(chǎn)量提升2倍及以上的突變體;

  • 相較于母本,大多數(shù)突變體的cDNA產(chǎn)量比母本提高2倍以上。其中,突變體M11的cDNA產(chǎn)量提高近3倍(圖3)。







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